jueves, 28 de mayo de 2015

PCR en Diabetes Mellitus

Tema: Mutaciones negativas dominantes en el PPAR gamma humano asociadas con la resistencia a la insulina grave, diabetes mellitus y la hipertensión.

Objetivos: Encontrar las mutaciones germinales en la pérdida de la función de PPAR gamma, proporcionando evidencia científica convincente de que este receptor es importante en el control de la sensibilidad a la insulina, homeostasis de la glucosa en la sangre y la presión arterial en el ser humano.

Tipo de muestra biológica: Compleja. Sangre con anticoagulante EDTA.

Tipo de ácido nucleico: DNA genómico.
  • Lisis: 
    • Física: centrifugación.
    • Químca: N-acetil L-cisteína, NaOH, método del citrato.
  • Separación: PBS.
  • Purificación: cromatografía.

Gen a amplificar: P467L, V290M y GST


Tipo de PCR: Simple
  • Desnaturalización: 97°C x 45 s.
  • Hibridación: 65°C x 1 min.
  • Elongación: 70° C x 1 min.

Visualización: EFO

Fuente:

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